[柯哀推理部]国庆中秋推理讲座 第三讲 案件现场的血痕检验

eleanora

想说大家中秋好，可中秋已经过去了，不过黄金周还没过去，今天推理部的讲座轮到我来发一讲关于刑侦的讲座，题目是“案件现场的血痕检验”，大家坐好准备上课！
记得上次推理部办讲座是推理名著欣赏，我下面的讲座也算为大家阅读《血字的研究》提供点理论基础吧~下面进入正题
特别鸣谢部长素为哀先生，谢谢他提供的支持和帮助，在这里也重申一遍推理部的口号：绝对忠于柯哀联盟，为把柯哀推理部建设成所有联盟中最强大，最活跃，最具凝聚力和战斗力的部门而奋斗！
下面为引用资料的原文地址：http://www.51gz.net/ReadNews.asp?NewsID=1425
http://slave4bs.spaces.live.com/ ... 74287BA3E!423.entry
案件现场的血痕检验
血 痕，是杀人案件现场中最常见、最重要的生物物证之一，也是犯罪嫌疑人杀人的重要证据。对现场血痕形状、颜色、分布、大小等情况的分析研究以及进一步的实验 室检验，可以判断案件性质、重现犯罪过程、推断作案时间，甚至直接认定作案工具和犯罪嫌疑人，为案件的侦破和审判工作提供非常重要的线索和证据。因此，法 医在勘查杀人案件现场时一定要注重对血痕的发现、研究与提取工作。
一、血痕的发现
[LEFT][LEFT]血 痕，可以广泛地附着在杀人现场的各个部位和各种物体上，因此比较容易发现。但在某些杀人案件中，犯罪分子为了逃避打击、毁坏证据，常常在现场的血痕上作文 章，对现场遗留的血痕作各种各样的处理，如：用水冲刷、擦拭等。尤其是杀人碎尸案件中的原始杀人现场，由于犯罪分子常常有充裕时间对血痕进行精心处理，发 现血痕很不容易。[/LEFT][/LEFT]
[LEFT][LEFT]但血液具有流动性、粘稠性、渗透性、颜色可变性、水份可蒸发性等特点，因此我们可充分利用这些特性，坚定信心，对现场血痕进行科学而细致的寻找。[/LEFT][/LEFT]
[LEFT][LEFT]血液具有一定的流动性，离体后，可由高处流向低处，由明显处流向隐蔽处，由表面处流向缝隙处。隐蔽部位、缝隙部位是血痕的常见之处。[/LEFT][/LEFT]
[LEFT][LEFT]血液具有一定的粘稠性，离体后，必然沾附在现场的有关部位或尸体上。现场表面的大量血液可能被擦掉冲走，而隐蔽部位的血痕往往不会处理得那么干净。[/LEFT][/LEFT]
[LEFT][LEFT]血液具有一定的渗透性，可渗入表面疏松的物体深层。虽经洗涤、冲刷，甚至刮削血液的附着物，但渗入物体深层的血液则仍可存留。[/LEFT][/LEFT]
[LEFT][LEFT]血液具有一定的颜色，离体后，颜色随时间、温度、湿度等条件的变化而变化。勘查现场时要懂得它的颜色变化规律，并可根据光谱学原理，借助多波段光源等先进设备仔细寻找。[/LEFT][/LEFT]
[LEFT][LEFT]血液中的水份容易蒸发，使血液变为血痂，常常较牢固的附着在现场的物体上。[/LEFT][/LEFT]
勘 查室内现场血痕时，除了要仔细检查地面、门窗等大件物品外，特别要注意在各种缝隙、锁扣、纸篓等细小隐蔽部位的寻找。室外现场，血痕常常沾附在树叶、树 枝、砖石、泥土等物体上，有时渗入泥土中。如果血量较少，血痕腐败变色，用肉眼观察不能辨别时，可借助不同角度的光照，也可用紫外线光或显微镜观察。对于 渗入泥土中的血或腐败血，要注意苍蝇经常起落和群聚的位置，必要时可进行联苯胺血痕预试验。
二、血痕的形状
1、滴状血痕
[LEFT][LEFT]血液由高处滴落于物体表面形成滴状血痕。血滴的形状因高度及方向而异。从10Cm 以内的高度垂直落下时呈圆齿状，边缘基本光滑。从50Cm高度落下时，圆滴周围边缘有明显的锯齿状突起。从100Cm高度落下时，圆滴周围边缘溅出的突起 十分突出，呈逗点状或线条状的小血痕。在受伤后行走时，血滴呈一定角度滴落于地面上，可形成一边呈锯齿状突起的圆形或椭圆形血滴，锯齿状突起指示行走的方 向。[/LEFT][/LEFT]
[LEFT][LEFT]在现场勘查中，常以牛奶、豆汁等与血液粘稠度相近的液体，加入红色颜料，进行现场滴落实验，以准确判断出血部位的高低，进而判断受伤人的出血部位。[/LEFT][/LEFT]
当然，血滴的形态也与受伤人的行进速度、现场风力、风向、血液量的多少、承受客体表面的光洁致密程度、吸附能力等方面有直接关系。
2、流柱状血痕
血液由高位向低位流下时形成流柱状血痕。其特点是呈长条状，上端血量少，色淡，下端血量多，膨大而色深。流注状血痕多为静脉或毛细血管出血时形成，可据此分析出流血时的体位等情况。
3、喷溅状血痕
动脉血管破裂出血，血液呈喷射状喷出，形成密集而均匀分布的喷溅状血斑点。当血液以倾斜方向喷射于物体表面时，血液呈惊叹号状，尖端指向喷射方向。重复打击受伤出血处时，可形成类似喷溅状血痕的飞溅血痕，其大小不等，形状不一，比较分散。
根据喷溅血痕的形状、位置、方向和角度，可判断受伤者在现场中的位置、姿态及损伤的部位等，进而判断犯罪分子在现场中的活动情况。在现场中只要发现了喷溅血痕，无论尸体存在与否，要考虑该现场是原始杀人现场。喷溅血痕与尸体的损伤必须相吻合。
4、擦拭状血痕
[LEFT][LEFT]带血物在血液未干时与他物接触并磨擦后形成擦拭状血痕。在杀人现场中发现擦拭状血痕，是行为人具有行为能力的征象。杀人现场中的擦拭状血痕主要有以下两种情况：[/LEFT][/LEFT]
故意擦拭血痕，是犯罪分子破坏现场、消灭血痕、故意擦拭而形成的。主要特征是：血痕面积一般较大，浓淡不均，擦拭方向不尽一致。在勘查中，要尽量寻找擦拭物，以核实犯罪分子的行为。
无意擦拭血痕，是犯罪分子或被害人在现场中活动的某一行为时形成的。主要特征是；一般擦拭面积不大，擦拭的方向大多一致，由于行为人出于无意，在血痕上形成的擦拭痕迹常常较轻、较少。这种情况，常可作为判断行为人的活动方向、活动距离、活动范围以及某些行为特征的依据。
5、接触状血印痕
染血的物品与其他物品接触后形成接触状血印痕，可反映出接触物表面的形态特征。如血手印、血指纹、血足迹等。
6、血泊
血泊是伤口大量出血，在受伤的地点聚集而形成的。受伤人多是处在昏迷、休克，或在不能行动的情况下形成的。血泊是原始杀人现场的证明。现场中尸体的损伤应与血泊相吻合。
根据血泊量的多少，可计算出血量的多少，进而判断受伤人出血后是否还有行为能力和生命能力。
根据血泊干涸程度和状态，以及现场的环境条件，可大体推断血泊形成的时间，进而判断杀人作案时间。
在杀人现场中遇到血痕，首先要注意鉴别是犯罪分子留下的还是被害人所留。是在什么动作、什么行为的情况下留下的。根据血痕在现场中的位置、方向、角度以及与尸体和某些有关物品的关系，判断犯罪分子在现场中的活动情况。有鉴定价值的血痕，一定要进行法医物证检验鉴定。
三、血痕的颜色
新鲜血液呈鲜红色，离体后其颜色要逐渐发生变化。影响血液颜色变化的主要因素有：时间、阳光、温度、湿度、附着客体等五个方面。
时间：在一般情况下，血液由鲜红色变为暗红色、红褐色、褐色、绿色至灰色，这是血液中血红蛋白变成正铁血红蛋白、又形成正铁血红素的结果。
阳光：阳光的直接照射，可使血痕的颜色变化加快。
温度：高温环境中，血液中的水份很快被蒸发，使血液变为红褐色的干涸斑点或结痂。低温环境中，血液可由鲜红色变为淡红色、乳白色至白色。当温度上升时，其颜色又可恢复呈红色。
湿度：如果血液处在阴暗而干燥的环境，其颜色变化就较为缓慢。如果血液处在潮湿而又不通风的现场环境，最容易腐败。腐败血因形成硫化血红蛋白而呈浅绿褐色至污绿色。
附 着客体：如果血痕附着在表面致密的物体或矿物质上，如塑料制品、瓷器等，血液难以渗入物体深层，其颜色就较一般为深。如果附着在表面疏松、吸附能力强的物 体上，由于很容易渗入物体的深层，其颜色就较一般为浅。血痕附着在颜色较深的棉、毛织品上，其颜色就不甚明显，不易被发现。
在现场勘查中，根据血痕干燥的程度和颜色的变化，结合环境条件，以及血痕附着客体的性质等，可帮助我们大致推测形成血痕的时间，进而推断发案时间。
四、血痕的提取
血 痕的提取，要根据血痕量的多少、附着客体的大小和性质来决定。附着在较小物体（如衣、帽、鞋等）上的血痕，可将物体整件提取，分别包装。附着在较笨重或固 定不动物体（如门窗、箱柜、墙壁等）上的血痕，如果沾附的血量较多，血液未干时，可用脱脂纱布在血液上面沾取或擦拭，使血液沾附在脱脂纱布上，待自然干燥 后送检。如果血痕已干燥，可用小刀将血痕的干块结痂刮取下来，用纸包好后送检。如果沾附的血量很少，或物品珍贵，一般采用拉线方法提取，即取干净的白纱纤 维，用蒸馏水浸湿后在血痕上来回反复磨擦拉拭，使血痕沾附在纱线上，待自然干燥后送检。对于附着在雪上的血痕，在提取中可连同雪块一起用脱脂纱布一并提 取，置于温度较高的自然室温中，待雪融化后，血痕自然就会沾附在纱布上，待自然干燥后送检。对于怀疑一氧化碳中毒的尸体，在血液的提取中，一定要注意将血 液装满容器后加盖密封，防止空气混入，这样才能得到正确的化验结果。总之，在提取血痕中应遵循的原则是：不能破坏血液的理化性质，尽量不破坏附着物的完整 性。
在 送检血痕时，一是要使血液自然干燥，不得高温烘烤，不得腐败变性。二是要将不同案件或同一案件现场的不同部位提取的血痕分别包装，互相间不得混合，以免影 响化验结果。三是要分别标好案件名称、提取部位、数量、名称和时间，防止混淆，影响检验，丧失血痕应有的作用，给侦察和审判带来不可弥补的损失。

eleanora

下面部分的专业知识理论知识居多~歹势~
血液或血痕(blood stain) 检验是物证检验中最常遇到和最重要的项目。一般占法医    物证检验的80%以上。
血痕检验常为案件的侦破和审判提供极为重要的线索和依据。血痕的存在，多半表示有人死伤，不论是他杀、自杀或灾害，根据血痕的分布、形状和其他情况，可以判断案件的性质。

一、血痕的形状
血痕有喷溅状、滴下状、流注状、擦拭状以及血印痕等。有时从其形状可推测血液的方向。血液滴在平面上呈园形滴 状，如落下的距离加长，其周围边缘呈明显锯齿状，甚至周围再溅出逗点状小血痕。血液斜向滴在平面上则在进行的方向形成突起，此锯齿状突起可指示行进的方 向，如倾斜到某种程正：滴下，可呈线条状或流注状。由动脉喷出飞溅的血液，由凶器叩击流出的血以及产生的飞沫，或粘有血液的凶器上下挥动时，由于离心力飞 溅出的血均可落在相当远的地方．血泊所在地往往是原始现场，根据血泊大小可估计出血量。凶犯手上粘有血液时，往往在凶器柄上、门框或门把上留有血指纹或血 掌纹。凶犯脚踩血液，则可遗留血鞋印或血足印，这些都属于血印痕，对确认凶犯有特别价值。被害人受伤后有行动能力时，也有遗留指纹或血足印等血印痕，应加 以鉴别。
二、血痕的实验室检验
常规分预试验、确证试验、种属判定及血型判定四个步骤进行。
(一)血痕的预试验  确定检材是否为血痕的预试验都是灵敏、简便的，但特异性低，    阳性结果仅表示是血的可能性。但这类试验如为阴性，除特殊情形外，基本可以否定血痕，故可用作筛选试验，从多数检材中，迅速筛选出需要进一步检验的斑痕。
1．酚酞试验(phenolphthalein test)
(1)原理：通过血痕中正铁血红素或血红蛋白的过氧化酶作用，使过氧化氢放山新生    态的氧，将无色的碱性酚酞氧化为红色的酚酞。
(2)试剂：20% KOH l00ml，酚酞2g，锌1g，三者混合置回流冷凝器装置下煮沸，使变为无色的碱性酚酞，过滤，滤液中加少量锌粉，保存于棕色瓶中备用．
(3)检查：取检材浸液——滴，置反应板或滤纸上，加碱性还原酚酞试剂1滴，3%过氧化氢1滴，如为血痕呈红色。灵敏度3万～5万倍。  
2．无色孔雀绿试验(leucomalachite green test)
(1)原理：与还原酚酞试验一样，利用血痕中酶作用分解出新生态氧，将无色孔雀绿    变为孔雀石绿.
(2)试剂：无色孔雀绿0．05g，冰醋酸10ml，蒸馏水50ml。
(3)检查：检材少许置滤纸上，加试剂1滴，3%过氧化氢1滴，如为血痕立即呈青兰色。灵敏度2万倍左右。
3．联苯胺试验(benzidine test)
(1)原理：同前。
(2)试剂：联苯胺无水酒精饱和液，3%过氧化氢，冰醋酸。 (近来证实联苯胺是致癌物质，正改用其他试剂)。
(3)检查：取检材微痕置滤纸上，依次加冰醋酸l滴，联苯胺无水酒精饱和液1滴。应不显兰色，如再滴加3%过氧化氢1滴，此时应立即出现兰或绿色者为阳性．灵敏度I：20万。      
4．鲁米诺试验(luminol test)
(1)原理：鲁米诺的碱性溶液在过氧化氢存在下与血红素反应发出强的萤光。
(2)试剂：鲁米诺0.1g，无水碳酸钠5g，30%过氧化氢15ml，加蒸馏水至100ml。
因这种溶液有弱的自体发光，可按0.2%的比例加入尿酸以抑制之.
(3)检查：在暗室中把试剂喷到检体上，如为血痕则发强萤光。此试验在黑暗的广面积场合最适用。且不损坏检体，以后还可用作进一步检验。灵敏度1—2万倍。
(二)血痕的确证试验  检材经本认验检查后能确证为血痕，特异性高，但灵敏度低，故有时阴性结果也不能否定血痕的存在。
1．血色原结晶试验(hemochromogen crystal test)血红素与各种碱基结合的化合物称为血色原，高山用葡萄糖还原血红蛋白，研究出容易形成血色原结晶的试剂，故称高山试剂。  
(1)试剂：葡萄糖3g，吡啶3ml，10% NaOH3ml，蒸馏水7m1。
(2)检查：置少许检材于载玻片上，加试剂1滴，盖上盖玻片，置室温放置片刻，镜检，在检材周围有樱红色长斜方形、菱形或菊花状结晶产生、灵敏度200倍左右。
2．氯化血红素结晶试验(hemin crystal test)。
(1)原理：血红蛋白受酸性作用，生成正铁血红素(hematin)，由氯的作用使正铁血红素成为氯化血红素结晶。
(2)检查：置检材于载玻片上，分别加食盐、冰醋酸各少许，加热至刚产生小气泡。如为血痕冷后则析出褐色长方形或菱形结晶。勿过热。受过高温的血痕不能出现阳性反应。
3. 吸收光谱试验(absorption test)。
(1) 原理：这种检验方法是利用一种叫分光镜的光学设备，可以利用太阳光谱来观察透明液体的吸收特性。将血红蛋白及其衍生物用分光镜观察，在特定的波长处可见吸 收线。分光镜有好几种类型，比如大实验室的分光镜、稍小一些的直观式分光镜和显微分光镜，显微反光镜可以直接安装在普通显微镜上。后两种设备只有当血液的 量很少时才使用。
(2)检查：先用水或生理盐水溶解血痕，然后放进一个小的边缘平行的玻璃槽内，以便光线可以直接穿过它。将玻璃槽放在分光镜内，然后调节设备，使光谱清晰可见。血痕溶液必须进行稀释，溶液可以从光谱中吸收一些光线，产生特征性的深色吸收带，吸收带根据血色素的类别而变化。
如 果血液是新鲜的，就可以用分光镜检验溶液中的氧合血红蛋白，然后加入一些硫化胺溶液进去，就可以获得血红蛋白的吸收带。如果加入氢氧化钠的稀释溶液，就会 出现血色原的吸收光谱。这些反应都是存在血液的证据，也可以用来排除那些来源于植物或动物的和氧合血红蛋白吸收光谱相似的物质。
陈旧的血液样本稀释后，既有高铁血红蛋白又有氧合血红蛋白的吸收带。如果在这些斑痕中的一个加入弱碱性溶液，就形成了碱性血红素。同样加入弱酸性溶液也形成了酸性血红素。
如果血液样本不但陈旧而且还有降解就需要检测血卟啉。在一部分血痕溶液中加入强硫酸，从而产生酸性血卟啉。另一部分血痕溶液中加入强碱性溶液，从而形成碱性血卟啉。
4．红细胞检查：比较新鲜的血痕，可用碱使干燥收缩了的红细胞膨胀后镜检．哺乳动  物的红细胞是无核的，但低等动物（如鸟类、两栖类、爬虫类和鱼类）的红细胞是有核的。然后再用显微测微计测定其直径。人的红细胞直径一般地比其他动物的大，约为8um。
(三)血痕的种属判定  经血痕确证试验认定为血痕后，还要判定是否为人血还是动物  血，是谓种属判定（Species identification）。种属试验通产采用的是沉淀反应。
当 某个动物被注射其它物种动物的抗原（如蛋白质）时，在它的血清内就会出现一种叫沉淀素的抗体，这种抗体只和该种抗原反应。假如这种被免疫的动物的血清和可 疑蛋白质或抗原的稀释溶液接触时，就会出现白色的云雾状的沉淀。因此，将人的血清或全血注射进兔的体内时，在其血清内的抗体就会和人血清、其它体液和组织 抽提物的蛋白质反应。反应是特异性的，如果是阳性结果，就证明血液中蛋白质或其它蛋白质来源于人类。抗人血清不会和其它种属动物的蛋白质反应。沉淀反应不 能确证某个样本是不是血液，除非抗血清特异性和人血红蛋白反应。一般来说，当检验可疑血痕时，首先是通过显微镜、化学分析和分光镜方法来确定血液是否存 在，然后才用沉淀反应确证样本是否来源于人类。
抗血清的制备：兔可以提供最合适的抗体，抗血清就是从这些抗体中制备的。每隔5天就给3只或4只兔 子静脉内注射2ml未稀释的血清2次或3次。在最后一次静脉内注射后6天通过腹腔内注射4或5ml的全血。r给兔子连续6或7天静脉内注射用生理盐水稀释 的1：10的血清2ml，停止一个星期然后接着皮下注射同等量的稀释血清。有些动物经过两次注射产生了有效的免疫血清，但还有一些需要第三次或第四次注 射。如果考虑时间的话，连续每天剂量为5ml、10ml和15ml的未稀释的血清或全血可能会被注射入腹腔内，在最后一次注射9天后给兔子取血并分离血 清。在所有这些方法中，都是在最后一次注射后7-10天给兔子取血。
不管使用哪种方法，在最后给动物取血前都要确证抗血清的效力。出于这个目的， 将6个直径为0.5cm的干净试管放置在试管架上，在第一个和第二个试管内放0.5ml的1：500稀释的人血清的生理盐水溶液。在第二个试管的稀释血清 中再加入0.5ml的盐溶液并充分混合，然后取0.5ml的该混合液转移至第三个试管中，在第三个试管中再加入0.5ml的盐溶液并混合。这个过程一直持 续下去，一直到第六个试管中有1ml的稀释溶液为止，然后将第六个试管中的溶液弃去0.5ml。这样这些试管中就包含0.5ml的下述稀释液：1号，1： 500；2号，1：1000；3号，1：2000；4号，1：4000；5号，1：8000；6号，1：16000。
用吸量管吸取待滴定抗血清， 吸量管的尖端接触第一个试管的底部，使抗血清可以在稀释液中缓慢流动直到加入0.1ml为止。在其它试管中重复上述步骤，但每个试管所使用的吸量管要分 开。由于抗血清比稀释液重，所以沉积在管底。还可以先将抗血清加在六个试管中，然后将不同的抗原稀释液加在抗血清上面，每个稀释液都要用不同的吸量管。如 果抗血清和某个稀释液反应，则在两者交界处会出现一道白线。相对应的抗血清在1：1000的稀释液中会立刻出现反应；而在1：16000的稀释液中通常会 在20分钟内出现反应。每个兔子的血清都要分开进行滴定，只将那些滴定相对应的保留下来进行实际检验，这些血清应该用1ml的安瓿或小瓶放在冰箱里保存， 更好一些的预防措施就是在加上氯仿、0.5%的石炭酸或1：10000的硫柳汞稀释液。
抗血清对人蛋白的特异性可以通过相同的方式用不同家畜的 1：200和1：100的血清稀释液来确证。一般溶液在20分钟后应仍然保持清澈，用于试验的血清准备好以后就在无菌环境下给兔子取血，因为好一些的抗血 清必须要经过消毒并保持清澈。通过过滤器可以获得无菌的抗血清，保持血清清澈的方法是在采集抗血清之前停止喂养动物18-24小时。
其它动物血液中蛋白的抗血清的制备方式可以和抗人血清一样。最好提供用其它脊椎动物的血液蛋白免疫过的兔子的血清，特别是常见的家畜。比如，某个被告声称斑痕是来自于一片牛肉，就必须用抗牛血清的沉淀试验来检验其真实性。
样 本制备：可疑斑痕可能来自许多物体，比如凶器、衣服、家具或装饰物等等。如果可疑斑痕是液状的，制备一份1：1000的稀释液就比较容易。但在大多数案件 中，斑痕是干燥的，只有将少量的检材溶解在少量的0.9%的盐溶液中才能制备符合条件的稀释液。制备的混合物应该是透明、无色和并且是中性的，如果不是就 要离心或用Seitz过滤器过滤。通常稀释液用石蕊试纸测试是否中性，如果是酸性或碱性，就要分别用0.1%的氢氧化钠溶液或盐酸进行中和。
给试 管加热并加入几滴稀释的醋酸或者25%的的硝酸溶液来检测1：1000的稀释样本中的蛋白含量。出现微弱的乳白色表明稀释液是符合条件的。为了进一步证 实，将一部分稀释液放置在一个试管中，相等量的0.9%盐溶液放在另一个试管中，用干的吸量管将空气吸进溶液中，在两个试管的溶液表面都会有泡沫出现，并 在含有稀释液的试管中一直持续下去，而在盐溶液中会很快消失。
陈旧的干燥血痕可能不太容易溶解在0.9%的氯化钠溶液中，抽提这种样本也比较耗时。如果溶解时间超过两个小时，就应该在冰盒中进行抽提，并加入一些氯仿以防止细菌生长。
从 检材中没有血痕的部分用0.9%的氯化钠溶液进行抽提，并在反应过程中作为对照组。这在布和皮革这类物质上的血痕检验中很适用，布和皮革与人的身体接触， 可能会含有使沉淀反应产生错误结果的成分，也可以用于难于和血痕进行分离的石灰。在任何案件中，确定是否存在可能会和抗血清反应并影响抗血清和嫌疑样本反 应有效性的有机物是很重要的
1．抗人血清沉淀素反应
(1)原理：用人血清免疫家免，产生与人血清蛋白起反应的沉淀素．这种沉淀素对与人亲缘相近的猿类动物血清蛋白也有反应，但与人血清蛋白反应最强。囱此须把检材稀释到不出现近缘反应，或用近缘反应的动物血清吸收后再与血痕浸出液反应。如是人血则发生明显沉淀反应。
(2) 检查：将血痕的生理盐水浸出液作系列稀释，用毛细营沉淀反应或琼脂内沉淀反应检查是否有沉淀环或沉淀线出现，如为人血，用毛细管沉淀反应稀释至数万倍还有 反应。如在琼脂板上进行对流免疫电泳，可测出稀释至3万倍的蛋白，斑痕上有杂质污染也不干扰。但本法因为是以人的蛋白为指标，故鼻涕、汗液、精液等与动物 血混合在一起时，恐有判断错误的危险，可进一步采取下面的方法。
2．抗人血红蛋白沉淀素反应
(1)原理：用人血红蛋白免疫家兔则产生只与 人血红蛋白发生反应的沉淀素，而不与人体其它蛋白起反应，即不仅有种属特异性，还有脏器特异性。与人以外的动物血红蛋白几乎不起反应。因此当与血痕浸出液 作用时，如发生明显的沉淀反应，可确证为人血，虽省略血痕的确证试验亦无妨碍。
(2)检查：制备血痕生理拄水浸出液的稀释系列，与使用抗人血清沉淀素同样的方法进行检查，如为人血当用毛细管沉淀试验时，虽稀释到数万倍也有反应。
3．纤维蛋白(Fibrin)平板法
(1)原理：由于人类血液中含有多量激活质原，将人的血痕置于纤维蛋白平板上，加上链激酶(Streptokinase)则使激活质原变成激活质，它能使纤维蛋白溶酶原变为纤维蛋白溶酶(plasmin)，后者可使纤维蛋白溶解。
(2) 检查：用PH7.8的巴比妥缓冲液溶解纤维蛋白原配成0.3%的溶液（thrombin 100单位／m1），制成纤维蛋白膜。取小片检材置膜上，加1mg%的链激酶溶液1滴，置37℃温箱中，如为人血8小时以内在检体周围发生纤维蛋白溶解， 纤维蛋白膜变透明。灵敏度2 万～4万倍左右。
4. 抗人球蛋白消耗试验
(1)原理：检材浸液中的人血清球蛋白与抗人球蛋白血清相遇时，抗人球蛋白被吸附 (消耗)，再用经球蛋白致敏的红细胞作指示剂，观察消耗后的抗人球蛋白血清对该红细胞的凝集力，如显著下降或消失，即证明检材中含人血清球蛋白。
(2)检查：将一定量血痕浸液与抗人球蛋白血清混合，置37℃30分钟，取1滴混合液与1滴由不完全Rh抗体（抗D)致敏的指示红细胞悬液放载玻片上，观察凝集情况。
本试验很灵敏，可测出1／50，000的人血清球蛋白。但不便于检验其，乞动物球蛋白，因其需用各种动物球蛋白致敏红细胞，难以做到，故多用此法作为沉淀反应的补充试验，以解决沉淀反应不能解决的问题。
(四) 血痕血型测定（grouping  of blood stain）  证明检材是人血后则进行血型测定。因为在人群中相同血型者很多，故如两份检材血型相同，并不一定是同一人的血。因而血型测定的意义主要在于否定。测定的血 型系统越多，越有价值(参第八章人人识别第五节血型。但在法医实际工作中所遇见的多为血痕，大部分检材不仅干燥、陈旧，甚至污染。这时，血细胞已干瘪或破 坏，甚至许多血型物质己被破坏或受干扰，故血疵的血型测定，较新鲜血液困难得多，在测定技木上也有不向，能测定的血型系统也相对减少。例如，目前己知的 15个红细胞血型系统，能在斑痕中测出的红细胞的血型系统仅有ABO，MN、Rh(主要抗原)、K、FY、JK等少数几种。在10多种血清型中仅可测出 Gm、Km、Hp、GC等因子。在20多种红细胞酶中，仅可测出PGM、AK、ADA、6PGD、G一6PD、EAP、GPT 及EsD等酶，而且还要条件较好的血痕。对HLA系统，近来有试用吸收法测定血痕的HLA抗原。血痕越陈旧，能测的血型越少。最常测定的是ABO及MN血 型系统。
血痕的ABO血型测定：
1．凝集素检测试验
(1)原理：ABO血型系统其血清中具有同种凝集素，故从J虹痕中检出凝集素亦可判定 血型。
(2)检查：将血痕碎片置载玻片上，分别滴加0.1% A型、B型、O型红细胞悬液后，盖上盖玻片, 20一30分钟后，若血痕周围看到凝集是为阳性反应，可判断血型。本法对陈旧约1个月的血痕还能应用。
2．吸收试验(absorption test)
(1)原理：调整抗A、抗B、抗H血清至一定效价，分别加入检体中，根据那种抗血清的效价降低或消失就知道与其反应的抗原存在与否，以此判定血型。
(2)检查：取三份血痕(1× 0.5cm大)，剪细放入三个小试管中，加效价为1：4的抗A、抗B、抗H血清各0.2 m1，置37℃两小时， 4℃过夜。将各抗血清分离后，倍数稀释至1—8倍，加1滴1%相对应的红细胞悬液，检查效价的变化，以判断血型，详见表19。
本法也可应用于其他式血型的测定。检查所必需的血痕量，ABO式血型为数mg，MN式，P式、Rh式血型为数+mg。
3. 解离试验（elution test）
（1）原理：把血痕用抗血清致敏，再用冷生理盐水洗净，只剩有与抗原结合了的抗体残留。加温使抗体从抗原解离，再加指示红细胞，从凝集的有无得知对应的抗原是否存在，从而判定血型。
(2) 检查：取细小血痕纤维—小段，用甲醇回定，分成3等份，分别加抗A、抗B、抗H血清1滴，置室温致敏1—2小时，将致敏的血痕用冷生理盐水洗三次后，再加 生理盐    水l滴．吸除盐水立即加0.2%对应型红细胞悬液1滴。置55℃加温10分钟，轻轻离心 (1，000／分)1分钟后，将沉淀摇动，移置载玻片上，镜下观察。从凝集的有无判定血型。
本法比吸收法显然灵敏得多，判定血型所必需的血痕量约为0.01mg，是为血痕的微量    检查，且相当陈旧的血痕也能判定血型。
4．混合凝集试验(mixed agglutination test)
(1)原理：血痕用抗血清致敏后，用冷生理盐水洗净，使与抗原结合了的抗体残留，加入指示剂红细胞，使与抗原结合了的抗体起反应，结果从血痕——抗体——红细胞三者的结合得知有无相对应的抗原，从而判定血型(图34)。  
(2) 检查：取0.2～0.5cm长的血痕纤维，放在凹玻片的两孔中，用甲醇固定，干后加1滴0.2%醋酸脱色。盐水洗净酸液，将纤维仔细分离，分别加抗A、抗 B血清1滴，放置1—3小时。吸去抗血清，用冷生嘘拄水冼3次，加2%相应型红细胞县液5～10滴，放置冰箱约30分钟。用镊子夹取纤维，放进生理盐水中 使游离的红细胞逐渐沉入盐水中，然后移置载玻片上，在显微镜下判定，纤维周围有红细胞附着者为阳性。
此法对组织切片、指纹、体液斑以及多年陈旧血痕和木乃伊组织仍呈阳性。故认为本法灵敏厦极高。
此外，还可用胶乳颗粒凝集试验(1atex partical agglutination)或标记抗体试验(1abelled antibody test)测定血型。
5．分泌型与非分泌型
根 据人的体液中(如唾液、精液、阴道液，汗液及胃液等)是否分泌有与其ABO血型相同的型物质，将人类分为分泌型(Secretors，Se型)与非分泌型 （nonsecretors, se型）两种。属分泌型者，在其体液中含有与其血型相同的型物质，即A型人分泌A型物质， B型人分泌B型物质，AB型人分泌A及B型物质，O型人分泌H物质。这些型物质也能特异性地与相应抗血清结合，因此能从各种体液中测定ABO血型；属非分 泌型者，在其体液中不含有与其血型相同的型物质。其实并非完全没有，而是含量极低，用微量检验法仍有可能测出。同是分泌型者还有强弱之分。
分泌型在人群中占75—80%，非分泌型占20～25%。
6. ABO血型在血痕测定中的重要性
ABO 血型在人体有天然抗体存在，容易制备，检验技术也较简单可靠。除血液外，人体其他组织细胞如毛发、骨骼、指甲、牙齿。脏器等均含有ABO血型抗原，在分泌 型人体的分泌液，如唾液，汗液、精液等也含有ABO血型抗原，但其他Ⅲ型抗原尚未发现或含量甚微。加之，血痕中ABO血型的抗原及其所含凝素集均能保存较 长的时间，这是其它血型系统所不及的。因此ABO血型在血痕测定中占有特别主要的地位。
血痕的MN血型测定：当两份检材结果ABO血型相同时，需要进行MN血型测定。 正常人血清中一般无抗M，抗N的抗体，需由免疫动物获得。因比，MN的鉴定只能依靠测定MN型凝集原，其方法基本同ABO血型，即可采用吸收试验，解离试验和混合凝集反应．
MN 血型抗原也位于红细胞基质上，对热及干燥也有相当低抗力，但较ABO血型物质脆弱。再者，抗M、抗N抗体常含有少量非特异凝集素。一般经过6个月的血痕可 检出。血痕时间越久，凝集反应越弱，检验就更为困难。如采用解离合并抗球蛋白法测定血痕的MN血型，则能提高检测的灵敏度。实践证明经2～3年的陈旧血痕 也可得阳性结果．
血清型及红细胞酶型测定：由陈旧一个多月的血痕中还可判定HP型，但血痕中过剩血红蛋白6需用离子交换剂或氯仿等除去。GC型不 安定， 2—3天后的血痕就不能判定型别。GM型，KM型即使经过数月后，还能从血痕判定型别。红细胞酶型的检出限度，PGM约为 3～6个月，PGD型、EsD型约为6月，GPT型、ACP型约为半月。
（五）出血部位的检查：月经血呈酸性，常含有用Logol氏液染色的阴道上皮细胞，检见单层柱状上皮细胞是子宫内膜细胞存在的确证。因月经血纤溶能力高，用纤维蛋白平板法可推定其活性或用电泳法测定乳酸脱氢酶(LDH)的同工酶特征以证明是否月经血。
鼻出血可检见纤毛柱状上皮细胞，偶见鼻毛．根据特殊细胞及其他成分可证明出血部位。
（六） 血痕的性别检查及其它：血痕的性别鉴别是用检查白细胞的X或Y染色质的方法。在法医学上以检查Y为主。检验时将血痂刮出，加2滴10—20%醋酸溶解，离 心沉淀，职沉淀物置载玻片上作涂片，干后再用甲醇固定，用0.5%盐酸阿的平染10～20分钟，置于萤光显微镜观察。阳性者可见强萤光小体。陈旧血痕阳性 率超过10%即可判定为男性。
PCR扩增amelogenin基因X～Y染色体同源特异片段鉴定性别是当前常用方法。人类牙釉质蛋白 amelogenin的基因为X染色体与Y染色体共有。X染色体上amelogenin基因(简称Amel～X)位于Xp22，而Y染色体上 amelogenin基因(简称Amel～Y)位于Y1lp22.2。由于存在不同程度的碱基缺失，人类Amel～X与Amel～Y的内含子长度不同。针 对Amel～X或Amel～Y碱基缺失部位两侧的X、Y染色体同源序列设计引物，可以用PCR扩增X、Y特异性片段。由于X、Y染色体碱基缺失不同， PCR扩增的X、Y特异性片段长度不同，据此可进行性别鉴定。
成人血、胎儿血的区别是用对成人或胎儿血红蛋白有特异的抗血清作沉淀反应，因胎儿血中含有甲胎蛋白(a-fetoprotein)，用对它特异的抗血清能够与成人血鉴别。              
妊妇血可用血清学检出妊娠结合球蛋白(pregnacy associated globulin)的方法，或检查有耐热性碱性磷酸酶的方法以及通过电冰检查来自胎盘的氨基肽酶的同工酶方法来证明。